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中药二维相关红外光谱指纹图谱的实验方法
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标题: 中药二维相关红外光谱指纹图谱的实验方法
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susie
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2008-06-24 15:15
中药二维相关红外光谱指纹图谱的实验方法
第一,样品的来源:
应该从中国药品生物制品检定所购买对照药材,以制备药材的标准图谱。在采集不同产地药材进行鉴定比较。
第二,固体样品的制备:
首先将药材样品研磨成粉末。由于药材硬度比较大,不易研磨,可采用液氮冷却法(将药材剪切成小碎块,放入研钵中,加入液氮,迅速研磨。反复多次即可),这样可以保证样品的成分不挥发。药材粉末的粒度一般应控制在200目以下,压片时取1~2mg即可,然后加入约200mg的KBr粉末,在研钵中研磨、混匀,转移到模具中,在低真空下用9.81GPa左右的压力,一般经过2min~5min即可将样品压成透明的薄片。压片的厚度约为1mm~2mm。注意:压片法所用的KBr必须很纯,应采用分析纯的或者KBr碎状晶体(最佳);KBr易吸水,KBr粉末必须进行干燥处理,一般要在120℃烘烤4小时以上;KBr粉末的粒度应控制在200目~300目之间。压片法可以保证谱图的质量及谱图的指纹性,易于推广应用。
第三,液体样品的制备:
在中药分析中常常会碰到大量的液体样品,如中药注射剂、汤剂等,可采用一些红外附件技术,如衰减全反射附件;对某些粘稠样品,可采用镜面反射附件等。但由于这些附件技术能量损失比较大,谱图的信噪比差,会直接影响谱图的质量。另外,样品中的溶剂水也会影响谱图的质量,影响谱图的分析(因为水有非常强的吸收)。因此,若要测定液态中药的标准谱图,最好还是采用经典的压片技术比较可靠,但事先必须除去溶剂水。常用的方法是采用冷冻干燥法,即先将液体样品冷冻后,在抽真空下脱水。然后将冷冻干燥后的粉末样品压片测定。
第四,光谱测定:
实验采用傅立叶变换红外光谱仪,光谱范围400cm-1~4000cm-1、DTGS检测器,分辨率4cm-1,扫描次数16次,扫描时实时扣除水和CO2的干扰。动态光谱的测定采用变温附件,样品于KBr粉末一起研磨压片,装在变温附件的样品架上测定光谱图。控温范围是室温至120℃,升温速度是2℃/min,每10℃采集一次光谱。
sign.
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